Verdünnung von Sekundärantikörpern

 

Sekundärantikörper von Jackson ImmunoResearch werden mit der höchsten Verdünnung in Immunoassays eingesetzt. Unsere Empfehlungen für den erfolgreichen Einsatz in ELISA, Western Blot, Histo- / Cytochemie und Durchflusszytometrie (FACS) haben wir in folgenden Übersicht zusammengestellt. Da die optimale Verdünnung von unterschiedlichen Faktoren abhängen kann, sollte jeder Anwender die richtige Gebrauchsverdünnung für sein Experiment empirisch bestimmen.

 

 

Sekundärantikörper

 

Produkt	Konjugat	ELISA	Western Blot	Histo- / Cytochemie	Durchflusszytometrie
Gesamt IgG und F(ab’)2	Unkonjugiert	10 – 20 µg/ml	10 – 20 µg/ml	10 – 20 µg/ml	10 – 20 µg/ml
Fab	Unkonjugiert	20 – 40 µg/ml	20 – 40 µg/ml	20 – 40 µg/ml	20 – 40 µg/ml
Gesamt IgG, F(ab’)2 und Fab	Alexa Fluor 488, 594, 647 und Cy3			1:100 – 1:800	1:100 – 1:800
Gesamt IgG	Alexa Fluor 680 und 790		1:50.000 – 1:200.000
Gesamt IgG	BV421 und BV480			1:50 – 1:200	1:50 – 1:200
Gesamt IgG, F(ab’)2 und Fab	AMCA, Cy2, FITC, TRITC, RRX			1:50 – 1:200	1:50 – 1:200
Gesamt IgG	Cy5			1:100 – 1:400	1:100 – 1:400
Gesamt IgG und F(ab’)2	R-PE und APC				1:50 – 1:200
Gesamt IgG und F(ab’)2	PerCP				1:25 – 1:100
Gesamt IgG und F(ab’)2	Horseradish Peroxidase (HRP)	1:5.000 – 1:100.000	1:5.000 – 1:100.000 ; 1:10.000 – 1:200.000 (ECL)	1:200 – 1:5.000
Gesamt IgG und F(ab’)2	Alkalische Phosphatase	1:5.000 – 1:50.000	1:5.000 – 1:50.000
Gesamt IgG, F(ab’)2 und Fab	Biotin (mit Fluorophor-konjugierten Streptavidin)			1:200 – 1:1.000	1:200 – 1:1.000
Gesamt IgG und F(ab’)2	Biotin (mit Enzym-konjugierten Streptavidin)	1:20.000 – 1:40.000	1:20.000 – 1:40.000	1:500 – 1:5.000	1:200 – 1:1.000

 

 

Streptavidin

 

Produkt	Konjugat	ELISA	Western Blot	Histo- / Cytochemie	Durchflusszytometrie
Streptavidin	R-PE und APC				1:50 – 1:200
Streptavidin	PerCP				1:25 – 1:100
Streptavidin	Horseradish Peroxidase (HRP)	1 – 2 µg/ml	1 – 2 µg/ml ; 0,01 – 1 µg/ml (ECL)	1 – 2 µg/ml
Streptavidin	Alkalische Phosphatase	1 – 2 µg/ml	1 – 2 µg/ml ; 0,1 – 1 µg/ml (ECL)	1 – 2 µg/ml
Streptavidin	Alle Alexa Fluor, DyLight 405 und Cy3			0,5 – 2 µg/ml	0,5 – 2 µg/ml
Streptavidin	Cy5			1 – 4 µg/ml	1 – 4 µg/ml
Streptavidin	Alle weiteren Fluorophore			2 – 5 µg/ml	2 – 5 µg/ml

 

Weitere Produkte

 

Produkt	ELISA	Western Blot	Histo- / Cytochemie	Durchflusszytometrie
4nm Colloidal Gold-Antikörper Komplex			1:20 – 1:200
6nm, 12 Colloidal Gold-Antikörper Komplex			1:20 – 1:40
18nm Colloidal Gold-Antikörper Komplex			1:10 – 1:20
Peroxidase-Anti-Peroxidase (PAP)	1:5.000 – 1:50.000	1:5.000 – 1:50.000	25 – 50 µg/ml, 1:400 – 1:800
ChromPure	10 µg/ml

 

Serum

 

Für die Blockierung von Hintergrundsignalen mit Normalseren empfehlen wir 5% v/v.