Zellkultur ist die Kultivierung lebender Zellen in einer künstlichen Umgebung außerhalb ihres Wirtsorganismus, die auf eine optimale Proliferation ausgerichtet ist. Kultivierte Zellen bieten der Forschung ein ideales Modellsystem zur Untersuchung physiologischer Prozesse wie Alterung, Metabolismus oder Wundheilung, für die Produktion spezialisierter Reagenzien und Proteine sowie zur Beschreibung der Auswirkungen von Testsubstanzen auf Zellwachstum und –tod bzw. auf bestimmte zelluläre Signalwege.
Obwohl man bei dem Begriff Zellkultur zuerst an Säugetierzellen denkt, beinhaltet er auch bakterielle oder Insekten-Zelllinien sowie die Kultivierung von Stammzellen. Unabhängig vom Zelltyp müssen bei der Kultivierung einige wichtige Bedingungen bedacht werden. Neben der generellen Beschaffenheit der Umgebung der Zellen, wie pH-Wert, Temperatur und Sauerstoffzufuhr, gehört dazu die Zusammensetzung des Nährmediums sowie weiterer Zusätze und Reagenzien.
Nährmedien
Die Hauptfunktion eines Zellkultur-Mediums ist die Versorgung der Zellen mit essentiellen Nährstoffen wie Vitaminen, Mineralien, Aminosäuren und Kohlehydraten, um das Zellwachstum zu gewährleisten. Eine Vielzahl fertiger Basalmedien sind kommerziell verfügbar. Aufgrund der unterschiedlichen Wachstumsbedingungen verschiedener Zelltypen ist es häufig nötig, diese Medien mit zusätzlichen Komponenten anzureichern. Serum wird häufig als Quelle wichtiger Wachstumsfaktoren, Hormone und adhäsionsfördernder Proteine zugegeben, manchmal werden noch zusätzliche Spurenelemente und Signalsubstanzen benötigt.
Zelldissoziations-Reagenzien
Während einige Zelltypen als Suspension kultiviert werden können, ist das Wachstum anderer abhängig von deren Anheftung an einen festen Untergrund, wie ihn eine Zellkulturflasche oder –platte bietet. Wenn diese adhärierten Zellen einen gewissen Grad an Konfluenz erreicht haben und umgesetzt werden müssen, oder wenn sie für eine experimentelle Anwendung wie einen Assay gebraucht werden, wird es nötig, sie von der Oberfläche abzulösen. Dafür wird ein Dissoziations-Reagenz benötigt. Häufig wird das proteolytische Enzym Trypsin für die Ablösung verwendet, daneben sind inzwischen viele Alernativen verfügbar, z.B. Accutase® und Celltase™.
Waschpuffer
Waschpuffer sind essentiell für die erfolgreiche Zellkultur, sei es zur Entfernung der Reste von Dissoziationsreagenzien, die bei längerer Exposition schon in geringer Dosis schädlich für die Zellen sein können, oder zur Entfernung von Serum, welches störend in Downstream-Assays sein kann. Phosphat-gepufferte Saline (PBS) und Hank’s Balanced Salt Solution (HBSS) sind als Waschpuffer gebräuchlich, daneben serumfreie Varianten verschiedener Kulturmedien.
Kryokonservierungsmedien
Die Kryokonservierung dient der Langzeit-Aufbewahrung von Zelllinien und dem Schutz vor dem Verlust einer Zelllinie durch Kontaminierung, Alterung und genetischer Veränderung. Eine typische Kryokonservierungslösung besteht aus dem Basalmedium, einem Konservierungsmittel wie DMSO und einer Proteinquelle, oft fötales Kälberserum (FBS). Während viele Forscher ihre eigenen Kryokonservierungsmedien anrühren, gibt es auch fertige Lösungen käuflich zu erwerben, die eine hohe Zellviabilität nach dem Auftauen versprechen.
BIOZOL bietet Ihnen eine große Auswahl an Zellkulturreagenzien, darunter Wachstumsmedien, Zelldissoziationsreagenzien, Waschpuffer, Kryokonservierungsmedien, aber auch Reagenzien für die Insekten- und Bakterien-Zellkultur sowie Stammzellkultur, u.v.m. Unser Angebot umfasst zudem eine Vielzahl an Produkten für die Downstream-Assays, in denen Ihre kultivierten Zellen Anwendung finden, wie Antikörper, Blocking-Peptide, Proteine, Reagenzien für die Durchflusszytometrie und Kits.
