Magic Red® Cathepsin Assay Kits
In vitro Überwachung intrazellulärer Cathepsin-Aktivität
Cathepsine sind eine Gruppe von Enzymen mit diversen Funktionen innerhalb und außerhalb von Zellen. Aufgrund ihrer unterschiedlichen Expression, Aktivität und Lokalisierung (endosomal, lysosomal, zytosolisch, extrazellulär) bei verschiedenen krankheitsassoziierten Zuständen, wie z. B. bei Immunstörungen, Krebs, Osteoarthritis und Stoffwechselkrankheiten, haben Cathepsine als diagnostische Biomarker an Aufmerksamkeit gewonnen. Während sich mehrere selektive Cathepsin-Inhibitoren bereits in der klinischen Entwicklung befinden, bedürfen viele biochemische Aspekte der Cathepsin-Wirkung noch weiterer Erforschung.
Die Magic Red® Assay Kits unserer Partnerfirma ImmunoChemistry werden von Forschern zur Quantifizierung und Überwachung der Kathepsinaktivität in kultivierten Zellen und Geweben verwendet.
In vitro Quantifizierung intrazellulärer Cathepsin-Aktivität über die Zeit
Das Magic Red®-Substrat fluoresziert nach Spaltung durch aktive Cathepsin-Enzyme rot. Da es zelldurchlässig ist, durchdringt es leicht die Zellmembran und die Membranen der inneren Zellorganellen - es sind keine Lyse- oder Permeabilisierungsschritte erforderlich. Wenn Cathepsin-Enzyme aktiv sind, wird das Magic Red®-Substrat gespalten und das Kresylviolett-Fluorophor fluoresziert bei Anregung. Nimmt die Enzymaktivität zu und mehr Magic Red®-Substrat wird gespalten, verstärkt sich das Signal. Das sich im Laufe der Zeit entwickelnde Fluoreszenzsignal lässt sich mit Hilfe der Fluoreszenzmikroskopie oder eines Fluoreszenzplattenlesegeräts leicht analysieren.
Hoechst 33342 und Acridin Orange sind in den Kits enthalten, um die Kernmorphologie bzw. die Struktur der lysosomalen Organellen nachzuweisen.
Verfügbare Magic Red® Cathepsin Assay Kits:
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